Prozesskontrolle der Flächendesinfektion Neuer Schnelltest wird erforscht

Das wfk – Cleaning Technology Institute in Krefeld entwickelt im Rahmen eines Forschungsprojektes eine Schnellmethode zur einfachen und schnellen Eigenkontrolle von Flächendesinfektionsprozessen. Als Basis dienen mit Fluoreszenzfarbstoff gefüllte Proteoliposomen.In hygienisch anspruchsvollen Bereichen, wie z.B. der Pharma- und Lebensmittelindustrie sowie dem Kosmetik- und Gesundheitssektor, sind Hygiene- und Desinfektionspläne ein essentieller Bestandteil von Qualitätsmanagementsystemen. In diesen Plänen ist die regelmäßige Durchführung von Reinigungs- und Desinfektionsmaßnahmen festgelegt. Zur Überprüfung des Erfolgs der Reinigung und Desinfektion werden stichprobenartige Endproduktkontrollen durchgeführt. Gegenwärtig werden zur Kontrolle der Flächendesinfektion klassische mikrobiologische Methoden wie das Abklatsch- oder Tupferverfahren verwendet, da geeignete Schnelltests für die Überprüfung der Flächendesinfektionen nicht zur Verfügung stehen. Solche Endproduktkontrollen sind jedoch sehr zeit- und kostenintensiv, da diese zumeist an externe Laboratorien vergeben werden müssen und frühestens nach zwei Tagen erste Ergebnisse liefern. Aufgrund der langen Untersuchungsdauer können gegebenenfalls erforderliche Korrekturmaßnahmen bei der Desinfektion nur mit großer zeitlicher Verzögerung erfolgen. Das wfk – Cleaning Technology Institute entwickelt derzeit eine Schnellmethode zur einfachen und schnellen Eigenkontrolle von Flächendesinfektionsprozessen. Als Basis dienen mit Fluoreszenzfarbstoff gefüllte Proteoliposomen. Desinfektionsmittel sind in der Lage, Zielstrukturen in Membranen wie z.B. eingelagerte Membranproteine von Mikroorganismen zu zerstören. Diese Membranschädigung führt zu einem Aufbrechen und Absterben der Zellen. Durch den Einsatz von Proteoliposomen ist es möglich, solche Zielstrukturen zu simulieren. Proteoliposomen sind kugelförmige Vesikel, die aus einer der Mikroorganismenmembran ähnlichen Phospholipiddoppelschicht und darin befindlichen Membranproteinen bestehen. Sie sind daher prinzipiell zur Entwicklung eines Prüfmonitors zur Simulation der Desinfektionsmittelwirkung gegenüber Mikroorganismen geeignet. Für die Herstellung des Prüfmonitors werden Proteoliposomen auf einem Träger immobilisiert, der dann bei Flächendesinfektionsprozessen auf die zu desinfizierende Oberfläche aufgebracht und entsprechend mitbehandelt wird. Um die Zerstörung der Proteoliposomen durch den Desinfektionsmitteleinfluss optisch sichtbar zu machen, werden Fluoreszenzfarbstoffe in den wässrigen Kern der Vesikel eingeschlossen. Geeignete Fluoreszenzfarbstoffe weisen in hohen Konzentrationen eine Fluoreszenzlöschung (kein Fluoreszenzsignal) auf. Tritt der Fluoreszenzfarbstoff durch die Zerstörung der Proteoliposomen mit Desinfektionsmitteln aus den Partikeln aus und wird dadurch verdünnt, wird die Fluoreszenzlöschung aufgehoben und ein fluoreszierendes Signal ist sichtbar. Die Fluoreszenzintensität des freigesetzten Farbstoffes gibt dann Auskunft über die Effektivität der Desinfektionsmaßnahme. In bisher durchgeführten Versuchen ist es gelungen, unter Variation der Konzentrationsverhältnisse verschiedener Phospholipide, Cholesterin und Proteine Proteoliposomen unterschiedlicher Zusammensetzung und Stabilität herzustellen. Unter Verwendung spezieller Methoden konnte die Größe der Proteoliposomen der Größe praxisrelevanter Mikroorganismen angepasst werden. Zusätzlich wurden Fluoreszenzfarbstoffe in die Proteoliposomen eingebracht, die bei hohen Konzentrationen eine Fluoreszenzlöschung aufweisen. Eine Zerstörung der Proteoliposomen zeigte, dass der Austritt des Fluoreszenzfarbstoffes aus den Liposomen zu einem deutlichen Fluoreszenzsignal führte. Die Stabilität der Proteoliposomen wurde so eingestellt, dass eine konzentrationsabhängige Zerstörung der Vesikel durch verschiedene Desinfektionsmittel erfolgt. Derzeit werden Versuchsreihen zur Immobilisierung von Proteoliposomen auf Trägermatrices zur Entwicklung eines Prüfmonitors durchgeführt. Weitere Infos zum Forschungsprojekt und zur Teilnahme am projektbegleitenden Ausschuss unter info@wfk.de. Dr. Rebecca Schneider | markus.targiel@holzmann-medien.de

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